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全胚和胎盘组织细胞悬液及充质干细胞鉴定

2023-08-01 14:59:11 來源: 微商品牌网 作者:佚名

  

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摘要:目的:探讨全胚胎及胎盘组织细胞悬液和间充质干细胞的抗衰老作用。 方法: 1.小鼠胎盘组织细胞悬液的制备,小鼠胎盘来源间充质干细胞的分离、培养及鉴定18天BALB/c小鼠胎盘(雌雄混合),制备小鼠胎盘通过吹悬、研磨、过滤等机械方法制备小鼠及胎盘组织细胞悬液; 通过密度梯度离心、两步离心结合贴壁培养的方法,从小鼠胎儿和胎盘组织中获得间充质干细胞,并鉴定细胞表面标志物; 诱导细胞分化为脂肪细胞和成骨细胞,并分别通过油红0染色和茜素红染色进行鉴定。 2、分别输注小鼠胎鼠、胎盘组织细胞悬液和小鼠胎鼠、胎盘源间充质干细胞我们首先腹腔注射6日龄BALB/c小鼠胎鼠组织细胞悬液和孕18天BALB/c小鼠15 个月大自然衰老雌性 BALB/c 小鼠腹腔内的胎盘组织细胞悬浮液。 其次胎盘组织液微商,将6日龄的BALB/c小鼠胎鼠和怀孕18天的BALB/c小鼠胎盘来源的间充质干细胞注射到其他15月龄自然衰老的雌性BALB/c小鼠的尾静脉中。不同的群体。 3、输注前后相关指标检测计算输注后小鼠的存活天数。 输注前及输注后3个月,超声心动图检查心输出量、每搏输出量、左心室舒张末期容积、左心室质量; 第二次超声检查后,血清学检测总超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、谷胱甘肽过氧化物酶活性等抗氧化能力指标; 其次,检测反映心脏功能的心脏质量指数(心脏质量/体重)和反映免疫功能的脾质量指数(脾脏质量指数)。 体重/体重)、反映消化道蠕动的结肠肌层厚度、干细胞致瘤性的解剖学检查; 对心肌、肾、肺、皮肤等器官的组织学老化程度进行评分,最后对自然死亡的小鼠Y染色体原位杂交检测植入的细胞。4zZ微商品牌网

结果:1.小鼠胎鼠和胎盘来源的间充质干细胞符合间充质干细胞表面标志物的特征,成脂诱导后油红0染色呈阳性。 成骨诱导后茜素红染色也呈阳性。 2、鼠胎鼠、胎盘组织细胞悬液输注组和鼠胎鼠源间充质干细胞输注组输注后存活期至少是相应对照组的1.3倍,差异有统计学意义(均P0 .05)。 3、输注后未发现对小鼠有不良影响,未发现干细胞有致瘤性; Y染色体原位杂交实验检测输注组所有小鼠器官中输注细胞的长期存活。 4.与对照组相比,小鼠胎儿组织细胞悬液输注组、小鼠胎盘组织细胞悬液输注组和小鼠胎鼠间充质干细胞输注组的心输出量和每搏输出量分别减少。 左心室质量减少、增加胎盘组织液微商,左心室舒张末期容积减少,心脏质量指数,脾质量指数,结肠肌肉厚度,心、肾、肺、皮肤等器官组织学老化评分,血清总超氧化活性歧化酶、丙二醛含量和谷胱甘肽过氧化物酶活性差异均有统计学意义(均P<0.05)。 5. 小鼠胎盘源间充质干细胞输注组与对照组除血清总超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、谷胱甘肽过氧化物酶活性差异均有统计学意义(均P<0.05),差异无统计学意义。输注后生存期等其他指标(均P>0.05)。 结论: 1.可以从小鼠胎盘中分离到间充质干细胞。 2、鼠胎鼠组织细胞悬液、鼠胎盘组织细胞悬液和鼠胎鼠源间充质干细胞对小鼠具有抗衰老作用。 3、小鼠胎盘间充质干细胞对小鼠没有明显的抗衰老作用。4zZ微商品牌网

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